ПЛР гепатиту C

ВГС зазвичай відсутній у матеріалі.

На відміну від серологічних методів діагностики вірусного гепатиту С, які виявляють антитіла до HCV, ПЛР дозволяє безпосередньо виявити наявність РНК HCV та кількісно визначити її концентрацію в досліджуваному матеріалі. Тест має видову специфічність та високу чутливість: для її виявлення достатньо десяти молекул РНК HCV у досліджуваному матеріалі. Виявлення антитіл до HCV лише підтверджує факт інфікування пацієнта, але не дозволяє судити про активність інфекційного процесу (реплікацію вірусу) та прогноз захворювання. Крім того, антитіла до HCV виявляються як у крові пацієнтів з гострим та хронічним гепатитом, так і у тих пацієнтів, які перехворіли та одужали, причому часто антитіла в крові з'являються лише через кілька місяців після початку клінічної картини захворювання, що ускладнює діагностику. Виявлення HCV у крові за допомогою ПЛР є більш інформативним діагностичним методом. Виявлення РНК HCV у ПЛР вказує на віремію, дозволяє судити про реплікацію вірусу в організмі та служить одним із критеріїв ефективності противірусної терапії. Виявлення РНК HCV за допомогою ПЛР на ранніх стадіях вірусної інфекції за повної відсутності будь-яких серологічних маркерів може служити найдавнішим доказом інфекції. Однак ізольоване виявлення РНК ВГС за повної відсутності будь-яких інших серологічних маркерів не може повністю виключити хибнопозитивний результат ПЛР. У таких випадках необхідна комплексна оцінка клінічних, біохімічних та морфологічних досліджень з повторним багаторазовим підтвердженням наявності інфекції за допомогою ПЛР.

Використання методу ПЛР у пацієнтів із хронічним вірусним гепатитом С має велике значення, оскільки у більшості з них відсутня кореляція між наявністю реплікації вірусу та активністю ферментів печінки. У таких випадках лише ПЛР дозволяє судити про наявність реплікації вірусу, особливо якщо кінцевий результат виражений кількісно. У більшості випадків захворювання зникнення РНК HCV із сироватки крові відбувається пізніше, ніж нормалізація ферментів печінки, тому їх нормалізація не може служити підставою для припинення противірусного лікування.

Практично важливо досліджувати не лише сироватку крові, а й лімфоцити та зразки гепатобіопсії методом ПЛР для виявлення РНК ВГС. У тканині печінки віруси можуть виявлятися в 2-3 рази частіше, ніж у сироватці крові. Оцінюючи результати аналізу сироватки крові на РНК ВГС, слід пам'ятати, що віремія може мати коливальний характер (як і зміни активності ферментів). Тому після позитивних результатів ПЛР-тесту може бути отриманий негативний результат і навпаки. У таких випадках краще дослідити зразки гепатобіопсії, щоб вирішити будь-які сумніви, що виникають.

Виявлення РНК ВГС у матеріалі за допомогою ПЛР використовується для таких цілей:

• вирішення сумнівних результатів серологічних тестів;
• диференціація вірусного гепатиту С від інших форм гепатиту;
• визначення гострої стадії захворювання у порівнянні з попередньою інфекцією або контактом; визначення стадії інфікування новонароджених від HCV-серопозитивних матерів;
• моніторинг ефективності противірусного лікування.

Пацієнти з підозрою на вірусний гепатит С:

• донори;
• особи з факторами ризику;
• особи з підвищеною активністю АЛТ;
• пацієнти з гострим гепатитом

Всі вищезазначені особливості оцінки результатів та підходи до діагностики ВГС за допомогою ПЛР стосуються також інших інфекцій.

Метод ПЛР дозволяє не тільки виявити РНК HCV у досліджуваному матеріалі, але й встановити його генотип. Визначення генотипу вірусу має велике значення для відбору пацієнтів із хронічним вірусним гепатитом С для лікування інтерфероном-альфа та рибавірином. Лабораторні показання для лікування хронічного вірусного гепатиту С інтерфероном альфа такі:

• підвищена активність трансаміназ;
• наявність РНК ВГС у крові;
• Генотип 1 ВГС;
• висока віремія в крові (більше 8×10⁶ ^копій /мл).

Наразі можливо кількісно визначити вміст РНК ВГС у сироватці крові за допомогою методу ПЛР, що має велике значення для моніторингу лікування інтерфероном альфа. Рівень віремії оцінюється наступним чином: при вмісті РНК ВГС від 102 ^до 104 ^копій /мл – слабкий; від 105 ^до 107 ^копій /мл – середній, вище 108 ^копій /мл – високий. При ефективному лікуванні рівень віремії знижується.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]