Весь контент iLive перевіряється медичними експертами, щоб забезпечити максимально можливу точність і відповідність фактам.
У нас є строгі правила щодо вибору джерел інформації та ми посилаємося тільки на авторитетні сайти, академічні дослідницькі інститути і, по можливості, доведені медичні дослідження. Зверніть увагу, що цифри в дужках ([1], [2] і т. д.) є інтерактивними посиланнями на такі дослідження.
Якщо ви вважаєте, що який-небудь з наших матеріалів є неточним, застарілим або іншим чином сумнівним, виберіть його і натисніть Ctrl + Enter.
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) у діагностиці інфекційних захворювань
Медичний експерт статті
Останній перегляд: 05.07.2025
ПЛР – один із методів ДНК-діагностики, що дозволяє збільшити кількість копій виявленої ділянки геному (ДНК) бактерій або вірусів у мільйони разів за допомогою ферменту ДНК-полімерази. Тестована ділянка нуклеїнової кислоти, специфічна для даного геному, багаторазово множиться (ампліфікується), що дозволяє його ідентифікувати. Спочатку молекула ДНК бактерій або вірусів розділяється на два ланцюги шляхом нагрівання, потім у присутності синтезованих ДНК-праймерів (нуклеотидна послідовність специфічна для визначуваного геному) вони зв'язуються з комплементарними ділянками ДНК, і другий ланцюг нуклеїнової кислоти синтезується після кожного праймера у присутності термостабільної ДНК-полімерази. Отримують дві молекули ДНК. Процес повторюється багато разів. Для діагностики достатньо однієї молекули ДНК, тобто однієї бактеріальної або вірусної частинки. Введення в реакцію додаткового етапу – синтезу ДНК на молекулі РНК за допомогою ферменту зворотної транскриптази – дозволило протестувати РНК-віруси, такі як вірус HCV. ПЛР – це триетапний процес, який циклічно повторюється: денатурація, відпал праймерів, синтез (полімеризація) ДНК. Синтезовану кількість ДНК визначають за допомогою ІФА або електрофорезу.
ПЛР може використовувати різні біологічні матеріали – сироватку або плазму крові, зішкріб уретри, біопсію, плевральну рідину, спинномозкову рідину тощо. ПЛР переважно використовується для діагностики інфекційних захворювань, таких як вірусний гепатит B, вірусний гепатит C, вірусний гепатит D, ЦМВ-інфекція, інфекції, що передаються статевим шляхом (гонорея, хламідіоз, мікоплазмова, уреаплазмова інфекції), туберкульоз, ВІЛ-інфекція тощо.
Перевага ПЛР у діагностиці інфекційних захворювань перед іншими методами дослідження полягає в наступному:
- інфекційний агент може бути виявлений у будь-якому біологічному середовищі організму, включаючи матеріал, отриманий під час біопсії;
- можливо діагностувати інфекційні захворювання на найранніших стадіях захворювання;
- можна кількісно оцінити результати дослідження (скільки вірусів чи бактерій міститься в досліджуваному матеріалі);
- висока чутливість методу; наприклад, чутливість ПЛР для виявлення ДНК вірусу гепатиту В у крові становить 0,001 пг/мл (приблизно 4×10² копій /мл), тоді як чутливість методу гібридизації ДНК з використанням розгалужених зондів становить 2,1 пг/мл (приблизно 7×10² копій /мл).
[