Аналіз на чутливість до антибіотиків: підготовка, розшифровка, скільки робиться

Сьогодні тестування на чутливість до антибіотиків стає все більш популярним. Мікрофлора людини досить різноманітна, представлена великою кількістю мікроорганізмів у різних біотопах.

Фармацевтичні компанії розробили велику кількість антибактеріальних засобів, антибіотиків, які допомагають підтримувати нормальне співвідношення та кількість мікробних популяцій. З настанням ери антибіотиків багато хвороб, які раніше вважалися смертельними, були вилікувані. Але мікроорганізми також прагнуть вижити, поступово адаптуючись до дії антибактеріальних препаратів. З часом багато з них набули стійкості до багатьох ліків, закріпили її в генотипі та почали передавати з покоління в покоління. Таким чином, нові мікроорганізми спочатку нечутливі до певних препаратів, і їх використання може бути неефективним. Фармацевти розробляють все більше нових продуктів, додаючи до них нові активні компоненти, змінюючи основну формулу. Але поступово розвивається стійкість і до них.

Причина підвищеної стійкості мікрофлори до багатьох препаратів, і навіть їх аналогів, часто криється в неправильному та безконтрольному застосуванні антибіотиків. Лікарі призначають антибіотики та їх комбінації при різних бактеріальних захворюваннях. При цьому немає попередньої оцінки того, наскільки вони будуть ефективними, не підбирається оптимальне дозування, що дуже важливо як для лікування, так і для запобігання механізмам розвитку подальшої резистентності. Багато людей помилково призначають антибактеріальну терапію навіть при вірусних захворюваннях, яка є неефективною, оскільки антибіотик не діє проти вірусів.

Терапію часто призначають без попереднього тестування на чутливість, не проводиться підбір активного агента та необхідного дозування для кожного конкретного захворювання та біотопу. Оскільки антибіотики призначаються «наосліп», нерідко трапляються випадки, коли вони не виявляють жодної активності проти мікроорганізмів, що викликали захворювання та чисельність яких необхідно зменшити. Натомість вони впливають на інших представників мікрофлори, в результаті чого виникає дисбактеріоз, який також є досить небезпечною патологією та може призвести до серйозних наслідків. Особливо небезпечними є випадки, коли антибіотик знищує нормальну мікрофлору, яка покликана захищати організм та підтримувати його нормальне функціонування. Також бувають випадки, коли призначається занадто велика або занадто мала доза препарату.

Пацієнти також безвідповідально ставляться до лікування. Часто лікування припиняють після того, як симптоми захворювання перестають турбувати. Водночас багато хто воліє не проходити повний курс. Це один із факторів, що сприяють розвитку резистентності у бактерій. Повний курс розрахований на повне знищення патогенної мікрофлори. Якщо курс не завершено, його повністю не знищують. Ті мікроорганізми, які виживають, зазнають мутацій, виробляють механізми, що забезпечують їм захист від цього препарату, і передають його наступним поколінням. Небезпека полягає в тому, що резистентність розвивається не лише щодо цього конкретного препарату, а й до всієї групи препаратів.

Тому сьогодні одним із найефективніших засобів раціональної терапії та профілактики резистентності є попереднє визначення чутливості до призначеного препарату та підбір його оптимального дозування.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Показання аналізу на чутливість до антибіотиків

Зазвичай такий аналіз слід проводити у всіх випадках, коли потрібна антибактеріальна терапія. Виходячи з основних законів антибіотикотерапії, будь-який антибіотик може бути призначений лише після попередньої оцінки чутливості мікрофлори до цього засобу та визначення оптимальної концентрації активної речовини в лабораторних умовах. На практиці, через різні причини та обставини, таке дослідження не проводиться до початку лікування, і лікар змушений підбирати препарат «навмання».

Сьогодні тестування на чутливість проводиться лише у випадках, коли у лікаря є серйозні сумніви щодо ефективності призначеного препарату, у випадках тривалої відсутності ефекту від препарату, а також при багаторазовому використанні одного й того ж препарату протягом обмеженого періоду часу. Чутливість часто визначається при лікуванні захворювань, що передаються статевим шляхом. Багато фахівців звертаються до аналізу у разі побічних ефектів, алергічних реакцій, а також коли необхідно замінити один препарат іншим.

Аналіз також часто використовується для підбору препаратів для антибактеріальної терапії у відновлювальний період після операцій, лапароскопічних втручань та видалення органів. У відділеннях хірургії та гнійної хірургії таке дослідження просто необхідне, оскільки тут досить швидко розвивається резистентність. Крім того, розвиваються надрезистентні «госпітальні». Багато приватних клінік підходять до призначення ліків з повною відповідальністю – лише після перевірки чутливості. У багатьох випадках бюджет державних установ просто не дозволяє проводити такі дослідження для кожного пацієнта, який потребує антибактеріальної терапії.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Підготовка

Підготовка до дослідження не вимагає жодних особливих заходів. Вона така ж, як і для будь-яких аналізів. За кілька днів до дослідження слід утриматися від вживання алкоголю. Вранці, в день збору матеріалу, в більшості випадків не можна їсти та пити. Але все залежить від виду аналізу. Матеріал для дослідження може бути різним, залежно від захворювання.

При захворюваннях горла та дихальних шляхів береться мазок з горла та носа. У венерології, гінекології, урології на аналіз беруться мазки з статевих органів та кров. При захворюваннях нирок часто потрібна сеча. При захворюваннях шлунково-кишкового тракту та деяких інфекційних захворюваннях досліджують кал та блювотні маси. Іноді можуть досліджувати грудне молоко, виділення з носа, секрет з очей, слину та мокротиння. При важких патологіях та підозрі на інфекційний процес досліджують навіть спинномозкову рідину. Спектр досить широкий.

Особливості збору матеріалу визначаються його біологічною приналежністю. Так, сечу та кал збирають вранці в чисту ємність або в спеціальну ємність для біологічного матеріалу. Грудне молоко збирають перед годуванням. Середню порцію беруть на дослідження. Мазок збирають за допомогою спеціального тампона, який проводять по слизових оболонках, потім опускають у пробірку з підготовленим середовищем. Кров збирають у пробірку, з пальця або вени. При зборі мазків з уретри або піхви рекомендується утримуватися від статевих актів протягом кількох днів.

Під час збору біологічного матеріалу для дослідження необхідно, перш за все, забезпечити правильність збору та стерильність. Але в більшості випадків це турбота медичного персоналу, пацієнту не варто про це турбуватися. Найчастіше до таких досліджень звертаються гінекологи та урологи, на другому місці – отоларингологи при лікуванні захворювань носоглотки та глотки, верхніх дихальних шляхів.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Техніка аналізу на чутливість до антибіотиків

Зібраний біологічний матеріал у стерильних умовах доставляється до лабораторії, де проводяться подальші дослідження. Насамперед проводиться його первинний посів на універсальні поживні середовища. Частина матеріалу також береться для мікроскопічного дослідження. Готується мазок для мікроскопії, проводиться дослідження, за допомогою якого можна визначити приблизну картину, припустити, які мікроорганізми присутні у зразку. Це дає можливість вибрати найоптимальніші середовища для подальшого дослідження та ідентифікації мікроорганізмів. Також при мікроскопії можна побачити ознаки, що вказують на запалення, онкологічний процес.

Протягом кількох днів колонії мікроорганізмів ростуть у чашці Петрі. Потім відбирають кілька колоній та переносять їх на селективні поживні середовища, які дозволяють визначити приблизну групу мікроорганізмів. Їх інкубують протягом кількох днів у термостаті, а потім починають ідентифікацію (визначення виду мікроорганізму). Ідентифікація проводиться за допомогою спеціальних біохімічних та генетичних тестів, ідентифікаторів. Додатково можуть проводитися імунологічні дослідження.

Після виділення основного збудника оцінюється його чутливість до антибіотиків. Для цього існує кілька методів. Найпоширенішим методом є серійне розведення або метод дискової дифузії. Методи детально описані в мікробіологічних довідниках, рекомендаціях та лабораторних стандартах.

Суть методу дискової дифузії полягає в тому, що ідентифіковані мікроорганізми висіваються на поживне середовище, а зверху розміщуються спеціальні диски, просочені антибіотиками. Посів інкубується в термостаті протягом кількох днів, потім вимірюються результати. Оцінюється ступінь пригнічення росту бактерій кожним антибіотиком. Якщо бактерія чутлива до антибіотика, навколо диска утворюється «зона лізису», в якій бактерії не розмножуються. Їх ріст повільний або взагалі відсутній. Діаметр зони пригнічення росту використовується для визначення ступеня чутливості мікроорганізмів до антибіотика та формулювання подальших рекомендацій.

Метод серійного розведення є найточнішим. Для цього мікроорганізми висівають на рідкі поживні середовища, додають антибіотик, розведений за десятковою системою розведення. Після цього пробірки поміщають у термостат для інкубації на кілька днів. Чутливість до антибіотиків визначається ступенем росту бактерій у поживному бульйоні з додаванням антибіотиків. Фіксується мінімальна концентрація, при якій мікроорганізми ще ростуть. Це мінімальне дозування препарату (необхідний перерахунок з мікробіологічних одиниць на діючу речовину).

Це стандартні мікробіологічні методи, що складають основу будь-якого дослідження. Вони передбачають ручне виконання всіх маніпуляцій. Сьогодні багато лабораторій оснащені спеціальним обладнанням, яке виконує всі ці процедури автоматично. Спеціалісту, який працює з таким обладнанням, потрібні лише вміння працювати з обладнанням, дотримання правил безпеки та стерильності.

Необхідно враховувати, що показники чутливості в лабораторних умовах та в живих організмах різко відрізняються. Тому людині призначають вищу дозу, ніж визначено під час дослідження. Це пов'язано з тим, що в організмі немає таких оптимальних умов для росту бактерій. У лабораторії створюються «ідеальні умови». Частина препарату може бути нейтралізована дією слини, шлункового соку. Частина нейтралізується в крові антитілами та антитоксинами, що виробляються імунною системою.

Тест сечі на чутливість до антибіотиків

Спочатку збирається біологічний матеріал. Для цього потрібно зібрати середню порцію ранкової сечі та доставити її до лабораторії. Важливо дотримуватися стерильності та не приймати антибіотики протягом кількох днів до аналізу, інакше можна отримати хибнонегативний результат. Після цього проводиться стандартний посів, суть якого полягає у виділенні чистої культури збудника та підборі антибіотика, який матиме на нього оптимальну бактерицидну дію. Визначається необхідна концентрація антибіотика.

Аналіз сечі найчастіше призначають при підозрі на інфекційно-запальний процес у сечостатевій системі, при імунодефіцитах та порушеннях обміну речовин. У нормі сеча є стерильною рідиною. Тривалість такого дослідження становить 1-10 днів і визначається швидкістю росту мікроорганізму.

Культуральний аналіз та тест на чутливість до антибіотиків

Дослідження передбачає виділення мікроорганізму, який є збудником, у чисту культуру. Іноді таких мікроорганізмів може бути кілька (змішана інфекція). Деякі мікроорганізми здатні утворювати біоплівки, які є своєрідними «мікробними спільнотами». Рівень виживання біоплівок значно вищий, ніж у окремих мікроорганізмів або асоціацій. Крім того, не всі антибіотики здатні впливати на біоплівку та проникати в неї.

Для визначення збудника, виділення його в чисту культуру, проводиться посів. Під час дослідження проводять кілька посівів на різні поживні середовища. Потім виділяють чисту культуру, визначають її біологічну приналежність та чутливість до антибактеріальних препаратів. Підбирають оптимальну концентрацію.

Для дослідження може бути використаний будь-який біологічний матеріал, залежно від захворювання та локалізації інфекційного процесу. Тривалість визначається швидкістю росту мікроорганізмів.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Тест на чутливість калу

Кал досліджують при різних захворюваннях шлунка та кишечника, при підозрі на інфекційний процес, бактеріальній інтоксикації, харчовому отруєнні. Мета дослідження – виділення збудника та підбір оптимальних антибактеріальних препаратів для нього, які матимуть високу активність. Важливість цього виду дослідження полягає в тому, що можна підібрати препарат, який впливатиме лише на збудника і не впливатиме на представників нормальної мікрофлори.

Перший і дуже важливий етап – збір калу. Його слід зібрати вранці у спеціальний стерильний контейнер. Зберігати не більше 1-2 годин. Жінкам з менструальними виділеннями слід відкласти аналіз до кінця, оскільки точність результатів зміниться. Матеріал доставляється до лабораторії для дослідження. Аналіз проводиться за стандартними мікробіологічними методиками посіву та виділення чистої культури. Також проводиться антибіограма. На основі висновку розробляються рекомендації та визначається подальша схема дослідження.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Аналіз на дисбактеріоз з чутливістю

Матеріалом для дослідження є кал, взятий одразу після акту дефекації. Нормальна мікрофлора шлунково-кишкового тракту складається з представників нормальної флори та кількох представників патогенної флори. Їх видовий склад, кількість та співвідношення суворо визначені та тримаються в межах допустимої норми. Якщо це співвідношення порушується, розвивається дисбактеріоз. Він може проявлятися по-різному. Інфекційні захворювання можуть розвиватися, якщо кількість патогенної мікрофлори різко збільшується. Якщо кількість будь-якого мікроорганізму різко зменшується, вільний простір займають інші представники, нетипові для шлунково-кишкового тракту, або патогенні. Часто вільний простір займає грибок, тоді розвиваються різні грибкові інфекції та кандидоз.

Для визначення кількісного та якісного складу кишкової мікрофлори проводиться аналіз калу на дисбактеріоз. Умовно всіх представників, що живуть у кишечнику, поділяють на три групи: патогенні, умовно-патогенні та непатогенні. Відповідно, аналіз складається з трьох частин. Кожна група мікроорганізмів має свої потреби в джерелі їжі, енергії. Кожній групі потрібні окремі поживні середовища та селективні добавки.

Спочатку проводиться мікроскопія та первинний посів. Потім, після посіву, відбираються найбільші колонії, подібні за морфологічними ознаками до представників кожної групи. Їх переносять на селективні середовища. Після вирощування мікроорганізмів їх ідентифікують та негайно перевіряють на чутливість до антибіотиків. Використовуються стандартні мікробіологічні методи.

Дослідження групи патогенних мікроорганізмів, крім стандартних досліджень, передбачає визначення бактерій черевного тифу, паратифу та дизентерії. Також визначається, чи є людина носієм цих мікроорганізмів. Комплексне дослідження на дисбактеріоз також включає дослідження представників групи біфідобактерій та лактобактерій. Дослідження триває близько тижня та залежить від швидкості росту мікроорганізмів.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Тестування на чутливість бактеріофагів

У разі кишкової інфекції для лікування замість антибіотиків часто використовуються бактеріофаги. Бактеріофаги – це бактеріальні віруси, чутливі лише до них. Вони знаходять бактерію, з якою комплементарні, проникають у неї та поступово руйнують бактеріальну клітину. В результаті інфекційний процес зупиняється. Але не всі бактерії чутливі до бактеріофагів. Щоб перевірити, чи проявить даний бактеріофаг активність щодо представників мікрофлори, необхідно провести аналіз.

Матеріалом для дослідження є кал. Аналіз необхідно доставити до лабораторії протягом години, інакше його буде неможливо провести. Необхідно проводити аналіз у кількох повтореннях. Початкова методика аналогічна такій для визначення чутливості до антибіотиків. Спочатку проводиться попередня мікроскопія зразка, потім первинний посів на універсальні поживні середовища. Далі виділяють чисту культуру на селективні поживні середовища.

Основна робота проводиться з чистою культурою. Їх обробляють різними видами бактеріофагів. Якщо колонія розчиняється (лізується), це свідчить про високу активність бактеріофага. Якщо лізис частковий, бактеріофаг функціонує помірно. За відсутності лізису можна говорити про стійкість до бактеріофага.

Перевагою фагової терапії є те, що бактеріофаги не впливають на організм людини та не викликають побічних ефектів. Вони прикріплюються до певних видів бактерій та лізують їх. Недоліком є те, що вони дуже специфічні та мають вибіркову дію, і не завжди можуть прикріплюватися до бактерій.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Аналіз мокротиння на чутливість до антибіотиків

Аналіз являє собою дослідження виділень з нижніх дихальних шляхів. Мета – визначити вид мікроорганізмів, які виступають збудником захворювання. Також проводиться антибіограма. У цьому випадку визначається чутливість збудника до антибіотиків, та підбирається оптимальна концентрація. Застосовується при захворюваннях дихальних шляхів.

Дослідження мокротиння та іншого вмісту легень і бронхів необхідне для вибору схеми лікування та диференціації різних діагнозів. Його використовують для підтвердження або спростування наявності туберкульозу.

Спочатку необхідно отримати біологічний матеріал. Його можна отримати шляхом кашлю, відхаркування або шляхом взяття з трахеї під час бронхоскопії. Існують спеціальні аерозолі, що сприяють відхаркуванню. Перед взяттям мокротиння слід прополоскати рот водою, що зменшить ступінь бактеріального забруднення ротової порожнини. Спочатку рекомендується зробити 3 глибоких вдихи та викликати продуктивний кашель. Мокротиння також можна взяти шляхом аспірації з трахеї. У цьому випадку в трахею вводиться спеціальний катетер. Під час бронхоскопії в порожнину бронхів вводиться бронхоскоп. У цьому випадку слизова оболонка змащується анестетиком.

Потім матеріал відправляють на дослідження до лабораторії. Проводять стандартний посів та мікроскопію. Далі виділяють чисту культуру та проводять з нею подальші маніпуляції. Виконують антибіограму, яка дає змогу визначити спектр чутливості бактерій та підібрати оптимальне дозування.

При підозрі на туберкульоз ранкове мокротиння досліджують протягом трьох днів. При тестуванні на туберкульоз результат буде готовий через 3-4 тижні. Оскільки мікобактерія туберкульозу, яка є збудником захворювання, росте дуже повільно.

У нормі повинні бути виявлені представники нормальної мікрофлори дихальних шляхів. Також необхідно враховувати, що при зниженому імунітеті показники нормальної мікрофлори можуть відрізнятися.

Аналіз сперми на чутливість до антибіотиків

Це бактеріологічне дослідження еякуляту сперматозоїдів з подальшим підбором чутливих антибіотиків та їх концентрацій. Найчастіше його проводять при лікуванні безпліддя та інших захворювань чоловічої репродуктивної системи. У тому випадку, якщо захворювання супроводжується інфекційним процесом. Основною причиною чоловічого безпліддя в більшості випадків є інфекція. Зазвичай спочатку проводиться спермограма. На основі результатів встановлюється запліднююча здатність сперматозоїдів. Якщо в цьому аналізі виявляється велика кількість лейкоцитів, можна говорити про запальний процес. У цьому випадку зазвичай негайно призначається мікробіологічний аналіз, оскільки запалення майже завжди супроводжується інфекцією. На основі отриманих результатів підбирається відповідна терапія. Дослідження зазвичай призначає андролог.

Простатит та венеричні захворювання також є приводами для проведення аналізу. Його також призначають, якщо у партнера виявлено венеричне захворювання.

Основою правильного аналізу є, перш за все, правильний збір біологічного матеріалу. Матеріал збирають у спеціальні посудини з широкою шийкою. Температура зберігання повинна відповідати температурі тіла людини. У цьому випадку матеріал можна зберігати не більше години. У замороженому вигляді його можна зберігати не більше доби. Недоцільно брати посів під час прийому антибіотиків, це змінює клінічну картину. Зазвичай посів беруть перед початком курсу антибіотикотерапії. Або припиняють прийом ліків за 2-3 дні до аналізу.

Потім висівають на поживне середовище. Інкубують у термостаті протягом 1-2 днів. Після цього виділяють чисту культуру, потім проводять ідентифікацію, визначають чутливість, а також тип і швидкість росту кожної колонії. Чутливість до антибіотиків визначають, якщо виявлені патогенні мікроорганізми. В середньому аналіз займає 5-7 днів.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Тест на чутливість до глютену

Існує багато тестів, які можна використовувати для визначення імунологічної чутливості до різних речовин або патогенів. Раніше основним методом було проведення тестів, заснованих на реакції аглютинації антитіл та антигенів. Сьогодні ці тести використовуються все рідше, оскільки їх чутливість значно нижча, ніж у багатьох сучасних методів, таких як глютенові тести. Найчастіше на практиці вдаються до аналізу слини на глютен та аналізу калу.

Тест на чутливість до глютену використовується для діагностики різних кишкових розладів. Він базується на реакції імунної системи. Якщо до калу додається глютен, реакція виникає або відсутня. Це вважається хибнопозитивним або хибнонегативним результатом. Позитивний результат вказує на схильність до коліту, високу ймовірність його розвитку. Він також підтверджує целіакію.

Також можливо провести тест на глютен, використовуючи слину як біологічний матеріал. Можна виміряти кількість антитіл до гліадину. Позитивний результат вказує на чутливість до глютену. Це може свідчити про високу ймовірність діабету. Якщо обидва тести позитивні, можна підтвердити діабет або целіакію.

[ 44 ], [ 45 ]

Тест на чутливість хламідій до антибіотиків

Аналіз проводиться при лікуванні інфекційно-запальних захворювань урогенітального тракту, якщо є підозра на хламідіоз. Матеріалом для дослідження є зішкріб зі слизової оболонки піхви - у жінок, мазок з уретри - у чоловіків. Збір проводиться в процедурному кабінеті з використанням одноразового обладнання. Важливо дотримуватися стерильності. Перед збором матеріалу слід утриматися від інтимної близькості протягом 1-2 днів до початку дослідження. Якщо у жінки менструація, матеріал збирають через 3 дні після її повного закінчення.

Матеріал доставляється до лабораторії. Повний аналіз включає попередню мікроскопію мазка. Це дає можливість візуально визначити мікрофлору за морфологічними ознаками та правильно підібрати поживні середовища. Вміст слизу, гною та епітеліальних частинок може прямо чи опосередковано свідчити про розвиток запального процесу або злоякісного переродження клітин.

Потім проводиться первинний посів. Культуру інкубують кілька днів у термостаті, а ідентифікацію проводять на основі культуральних характеристик. Далі культуру переносять на селективні поживні середовища, призначені для культивування хламідій. Отримані колонії ідентифікують за допомогою біохімічних тестів. Далі стандартними методами визначають чутливість до антибіотиків. Підбирають найчутливіший антибіотик та його концентрацію. Для культивування хламідій потрібні спеціальні середовища, розроблені спеціально для цього виду мікроорганізмів, які містять усі необхідні речовини та фактори росту.

Також можливо провести дослідження біологічним методом. Для цього щурів заражають збудником. У деяких лабораторіях замість щурів використовують спеціально вирощену культуру тканин. Це пов'язано з тим, що хламідії є внутрішньоклітинними паразитами, і для їх культивування потрібні спеціальні умови. Потім мікроорганізми визначають методом ПЛР. Для визначення чутливості їх пересаджують на селективне поживне середовище для хламідій, і через кілька днів фіксують результати. Резистентність або чутливість оцінюють за пригніченням інфекційного процесу в клітинах.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Скільки часу потрібно, щоб зробити тест на чутливість до антибіотиків?

В середньому аналіз робиться протягом 5-7 днів. Деякі аналізи займають більше часу. Наприклад, при діагностиці туберкульозу на результати доводиться чекати від 3 тижнів до місяця. Все залежить від швидкості росту мікроорганізмів. Часто співробітникам лабораторії доводиться мати справу з випадками, коли пацієнти просять зробити аналіз швидше. І навіть пропонують «додаткову оплату» за терміновість. Однак тут потрібно розуміти, що в цьому випадку від дій лаборанта нічого не залежить. Залежить лише від того, як швидко росте мікроорганізм. Кожен вид має свою, суворо визначену швидкість росту.

Норма

Не існує абсолютних універсальних норм для всіх аналізів. По-перше, ці значення можуть відрізнятися для кожного біотопу. По-друге, вони індивідуальні для кожного мікроорганізму. Тобто, норми для одного й того ж мікроорганізму, скажімо, для горла та кишечника, різні. Так, якщо в горлі переважає стафілокок як представник нормальної мікрофлори, то в кишечнику переважають кишкова паличка, біфідо- та лактобактерії. Значення для одного й того ж мікроорганізму в різних біотопах також можуть суттєво відрізнятися. Наприклад, Candida може в нормі бути присутня в певній кількості в урогенітальній мікрофлорі. У ротовій порожнині вони зазвичай відсутні. Наявність Candida в ротовій порожнині може свідчити про їх штучне занесення з їхнього природного середовища існування.

Сеча, кров, спинномозкова рідина – це біологічні середовища, які в нормі повинні бути стерильними, тобто не повинні містити жодної мікрофлори. Наявність мікрофлори в цих рідинах свідчить про сильний запальний, інфекційний процес, а також вказує на ризик розвитку бактеріємії та сепсису.

Загалом існує приблизна класифікація. Одиницею вимірювання в мікробіології є КУО/мл, тобто кількість колонієутворюючих одиниць в 1 мілілітрі біологічної рідини. Ступінь забруднення визначається кількістю КУО та коливається в широкому діапазоні від 101 ^до 109. ^{Відповідно}, ¹⁰¹ – це мінімальна кількість мікроорганізмів, ¹⁰⁹ – важкий ступінь інфекції. Водночас, діапазон до 103 ^{вважається} нормальним, усі показники вище цього числа свідчать про патологічне розмноження бактерій.

Щодо чутливості до антибіотиків, то всі мікроорганізми поділяються на резистентні, помірно чутливі, чутливі. Цей результат часто виражається як якісна характеристика, що вказує на МІД – мінімальну інгібуючу дозу антибіотика, яка все ще пригнічує ріст мікроорганізму. Для кожної людини, як і для кожного мікроорганізму, ці показники суворо індивідуальні.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Пристрій для аналізу

При проведенні бактеріологічних досліджень, особливо з визначенням чутливості до антибіотиків, одного приладу буде недостатньо. Необхідне повне, комплексне оснащення бактеріологічної лабораторії. Потрібно ретельно спланувати та підібрати обладнання, яке відповідатиме кожному етапу дослідження. На етапі збору біологічного матеріалу необхідні стерильні інструменти, коробки, ящики, контейнери, камери для зберігання та транспортне обладнання для доставки матеріалу до лабораторії.

У лабораторії, перш за все, вам знадобиться високоякісний мікроскоп для мікроскопії мазка. Сьогодні існує велика кількість мікроскопів, які мають різноманітні властивості – від традиційних світлових до фазово-контрастних та атомно-силових мікроскопів. Сучасне обладнання дозволяє сканувати зображення в тривимірному просторі та досліджувати його при великому збільшенні з високою точністю.

На етапі посіву та інкубації мікроорганізмів можуть знадобитися автоклави, сухожарові шафи, ексикатори, парові лазні, центрифуга. Потрібен термостат, в якому відбувається основна інкубація біологічного матеріалу.

На етапі ідентифікації мікроорганізмів та проведення антибіограми можуть знадобитися мікроманіпулятори, мас-спектрометри, спектрофотометри, колориметри для різних розрахунків та оцінки біохімічних властивостей культур.

Крім того, сучасні лабораторії можуть бути оснащені високотехнологічним обладнанням, яке виконує всі вищезгадані основні етапи дослідження, аж до розрахунку результатів в автоматичному режимі. До таких пристроїв належить, наприклад, складний пристрій бактеріологічної лабораторії на базі часопролітного мас-спектрометра. Ця лінійка пристроїв дозволяє розділити всю територію лабораторії на три зони. Перша зона – брудна, де приймаються та реєструються аналізи. Друга зона – робоча зона, де власне проводяться основні мікробіологічні дослідження. І третя зона – стерилізаційна та автоклавна, де здійснюється підготовка та утилізація робочого матеріалу.

Моделі дозволяють інкубацію в широкому діапазоні температур та умов. Містить вбудований аналізатор крові та інших біологічних зразків, який видає результати з високою точністю та надійністю. Комплект включає електронні ваги, бідистилятори, центрифуги, автоклави та стерилізаційні шафи, автоматичний варильник середовищ, водяну баню з вбудованою мішалкою, pH-метри, термометри та мікроскопи.

Також використовується мікробіологічний аналізатор, в який поміщаються зразки, що підлягають тестуванню, поживні середовища та набори тестів для визначення чутливості. Прилад виконує необхідні дослідження та видає готовий висновок.

Підвищення та зниження показників

Розшифрувати аналіз може лише лікар. Але часто пацієнти, отримавши результати, панікують, помічаючи велику кількість незрозумілих символів і цифр. Щоб не заплутатися, бажано мати хоча б загальне уявлення про те, як розшифрувати аналіз на чутливість до антибіотиків. Зазвичай, перший пункт у результатах вказує назву мікроорганізму, який є збудником захворювання. Назва дається латиною. Також може вказувати на представника нормальної мікрофлори, що переважає в організмі, тому панікувати не варто. Другий пункт вказує на ступінь обсіменіння, тобто кількість мікроорганізмів. Зазвичай це число коливається від 101 ^до 109. ^Третій пункт вказує на форму патогенності, а четвертий - назви антибактеріальних препаратів, до яких чутливий цей мікроорганізм. Поруч вказується мінімальна інгібуюча концентрація, при якій пригнічується ріст мікроорганізму.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]